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    上海云序生物科技有限公司
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    云序生物

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    上海市松江區莘磚公路518號24號樓4樓

    tRNA 2'-O-甲基化測序(NM-seq)

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    云序生物2'-O-RNA甲基化測序服務(wù)(NM-seq),可對2'-O-RNA修飾進(jìn)行高通量檢測和單堿基定位。此外,云序生物針對2'-O-RNA甲基化開(kāi)發(fā)了多款產(chǎn)品,可實(shí)現對mRNA、LncRNA、pri-miRNA、tRNA和rRNA等多類(lèi)RNA分子的2'-O-RNA甲基化修飾水平的全 面檢測。
    技術(shù)詳情
    技術(shù)簡(jiǎn)介
    2'-O-RNA甲基化是一種受RNA甲基化酶或纖維蛋白酶作用下,核糖RNA在2’位置上發(fā)生甲基化的化學(xué)修飾。在哺乳動(dòng)物、酵母、植物、病 毒等物種中普遍存在。已有研究表明,2'-O-RNA甲基化修飾在mRNA、tRNA、rRNA、miRNA等分子上分布。從結構上,2'-O-RNA甲基化通過(guò)提高核苷酸的疏水性,從而增強其穩定性。已有研究表明,2'-O-RNA甲基化影響mRNA與蛋白的結合、調控rRNA翻譯效率、參與tRNA識別等生物過(guò)程。近年來(lái),2'-O-RNA甲基化修飾作為一類(lèi)新型RNA甲基化,高影響因子文章不斷,是繼m6A修飾之后的又一表觀(guān)轉錄組學(xué)熱點(diǎn)。
    云序生物2'-O-RNA甲基化測序服務(wù)(NM-seq),可對2'-O-RNA修飾進(jìn)行高通量檢測和單堿基定位。此外,云序生物針對2'-O-RNA甲基化開(kāi)發(fā)了多款產(chǎn)品,可實(shí)現對mRNA、LncRNA、pri-miRNA、tRNA和rRNA等多類(lèi)RNA分子的2'-O-RNA甲基化修飾水平的全 面檢測。

    云序優(yōu)勢 
    單堿基分辨
    可對2'-O-RNA甲基化修飾進(jìn)行單堿基定位。
    高通量檢測
    可對全轉錄組范圍內的2'-O-RNA位點(diǎn)進(jìn)行高通量地平行檢測。
    全分子覆蓋
    可全 面地對mRNA、LncRNA、pri-miRNA、tRNA和rRNA等多類(lèi)RNA分子的2'-O-RNA甲基化位點(diǎn)進(jìn)行檢測。
    一站式服務(wù)
    客戶(hù)僅需提供組織或細胞,云序生物一站式完成RNA抽提,樣品預處理,建庫,測序,數據分析全套流程。
    專(zhuān)業(yè)的生物信息學(xué)分析
    專(zhuān)業(yè)的生物信息學(xué)團隊,能夠滿(mǎn)足客戶(hù)的各類(lèi)深入數據分析需求。

    案件分析
    案例1:人類(lèi)mRNA上2'-O-RNA甲基化轉錄組圖譜
    原文:Nm-seq maps 2'-O-methylation sites in human mrna with base precision 
    期刊:Nature Methods 影響因子:26.9
    美國芝加哥大學(xué)研究團隊利用2'-O-RNA甲基化測序手段,檢測mRNA分子上的甲基化位點(diǎn)。與m6A RNA甲基化測序數據相比,2'-O-RNA甲基化位點(diǎn)主要分布在轉錄組CDS區,其中近一半在剪接位點(diǎn)附近,相當一部分在內含子中發(fā)現Nm位點(diǎn)。三分之一的2'-O-RNA甲基化位點(diǎn)在A(yíng)GAUC處存序列偏好性,并且跟隨了5個(gè)堿基的A或G堿基高影響分子布。有趣的是,2'-O-RNA甲基化位點(diǎn)富含三種氨基酸的編碼密碼子??偟膩?lái)說(shuō),該文章揭示了2'-O-RNA甲基化在人類(lèi)細胞中的分布特征。
         人類(lèi)Hela細胞mRNA分子上2’-O-RNA甲基化位點(diǎn)的特征
    圖1. 人類(lèi)Hela細胞mRNA分子上2'-O-RNA甲基化位點(diǎn)的特征

    案例2:2'-O-RNA甲基化酶FTSJ3協(xié)助HIV病 毒逃避宿主細胞免疫識別機制
    原文:FTSJ3 is an RNA 2'-O-methyltransferase recruited by HIV to avoid innate immune sensing
    期刊:Nature  影響因子:41.6
    外國研究人員首先借助蛋白互作實(shí)驗證實(shí)TRBP蛋白能夠在不依賴(lài)于DICER酶的作用下與FTSJ3結合,形成復合物,因此推測,FTSJ3是一種2'-O-甲基化轉移酶。接著(zhù),體外和體內實(shí)驗表明FTSJ3就是一種通過(guò)TRBP被招募到HIV RNA上的2'-O-甲基化轉移酶。通過(guò)優(yōu)化的2'-O-RNA甲基化測序手段,證實(shí)在HIV病 毒遺傳信息的特定位置上存在依賴(lài)于FTSJ3的2'-O-甲基化修飾。綜上,該研究證實(shí)TRBP-FTSJ3復合物通過(guò)招募到HIV病 毒RNA發(fā)生2'-O-甲基化從而解釋了HIV病 毒逃避宿主細胞先天免疫識別的機制。
           TRBP蛋白在不依賴(lài)于DICER酶情況下與FTSJ3結合;HIV病毒RNA上存在多處2’-O-RNA甲基化位點(diǎn)
    圖2. TRBP蛋白在不依賴(lài)于DICER酶情況下與FTSJ3結合;HIV病 毒RNA上存在多處2'-O-RNA甲基化位點(diǎn)

    樣本要求
    樣品類(lèi)型 
    細胞、組織或RNA,其他樣本類(lèi)型請電詢(xún)。 
    樣品量
    a) 細胞:1×10
    b) 組織:500 mg - 5g
    c) RNA:100 μg - 300 μg (OD260/280:1.6-2.3; RNA無(wú)明顯降解) 

    樣品運輸及保存
    樣品運輸:樣品置于1.5mL離心管中,封口膜封好,干冰運輸。 
    樣品保存:細胞樣品或新鮮組織塊可用TRIZOL或RNA保護劑處理,液氮凍存后-80℃保存;RNA樣品可溶于乙醇或RNA-free的超純水中,-80℃保存,避免反復凍融。


    tRNA 2'-O-甲基化測序(NM-seq)
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    021-64878766
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    2'-O-RNA甲基化是一種受RNA甲基化酶或纖維蛋白酶作用下,核糖RNA在2’位置上發(fā)生甲基化的化學(xué)修飾。在哺乳動(dòng)物、酵母、植物、病 毒等物種中普遍存在。已有研究表明,2'-O-RNA甲基化修飾在mRNA、tRNA、rRNA、miRNA等分子上分布。從結構上,2'-O-RNA甲基化通過(guò)提高核苷酸的疏水性,從而增強其穩定性。已有研究表明,2'-O-RNA甲基化影響mRNA與蛋白的結合、調控rRNA翻譯效率、參與tRNA識別等生物過(guò)程。近年來(lái),2'-O-RNA甲基化修飾作為一類(lèi)新型RNA甲基化,高影響因子文章不斷,是繼m6A修飾之后的又一表觀(guān)轉錄組學(xué)熱點(diǎn)。
    云序生物2'-O-RNA甲基化測序服務(wù)(NM-seq),可對2'-O-RNA修飾進(jìn)行高通量檢測和單堿基定位。此外,云序生物針對2'-O-RNA甲基化開(kāi)發(fā)了多款產(chǎn)品,可實(shí)現對mRNA、LncRNA、pri-miRNA、tRNA和rRNA等多類(lèi)RNA分子的2'-O-RNA甲基化修飾水平的全 面檢測。

    云序優(yōu)勢 
    單堿基分辨
    可對2'-O-RNA甲基化修飾進(jìn)行單堿基定位。
    高通量檢測
    可對全轉錄組范圍內的2'-O-RNA位點(diǎn)進(jìn)行高通量地平行檢測。
    全分子覆蓋
    可全 面地對mRNA、LncRNA、pri-miRNA、tRNA和rRNA等多類(lèi)RNA分子的2'-O-RNA甲基化位點(diǎn)進(jìn)行檢測。
    一站式服務(wù)
    客戶(hù)僅需提供組織或細胞,云序生物一站式完成RNA抽提,樣品預處理,建庫,測序,數據分析全套流程。
    專(zhuān)業(yè)的生物信息學(xué)分析
    專(zhuān)業(yè)的生物信息學(xué)團隊,能夠滿(mǎn)足客戶(hù)的各類(lèi)深入數據分析需求。

    案件分析
    案例1:人類(lèi)mRNA上2'-O-RNA甲基化轉錄組圖譜
    原文:Nm-seq maps 2'-O-methylation sites in human mrna with base precision 
    期刊:Nature Methods 影響因子:26.9
    美國芝加哥大學(xué)研究團隊利用2'-O-RNA甲基化測序手段,檢測mRNA分子上的甲基化位點(diǎn)。與m6A RNA甲基化測序數據相比,2'-O-RNA甲基化位點(diǎn)主要分布在轉錄組CDS區,其中近一半在剪接位點(diǎn)附近,相當一部分在內含子中發(fā)現Nm位點(diǎn)。三分之一的2'-O-RNA甲基化位點(diǎn)在A(yíng)GAUC處存序列偏好性,并且跟隨了5個(gè)堿基的A或G堿基高影響分子布。有趣的是,2'-O-RNA甲基化位點(diǎn)富含三種氨基酸的編碼密碼子??偟膩?lái)說(shuō),該文章揭示了2'-O-RNA甲基化在人類(lèi)細胞中的分布特征。
         人類(lèi)Hela細胞mRNA分子上2’-O-RNA甲基化位點(diǎn)的特征
    圖1. 人類(lèi)Hela細胞mRNA分子上2'-O-RNA甲基化位點(diǎn)的特征

    案例2:2'-O-RNA甲基化酶FTSJ3協(xié)助HIV病 毒逃避宿主細胞免疫識別機制
    原文:FTSJ3 is an RNA 2'-O-methyltransferase recruited by HIV to avoid innate immune sensing
    期刊:Nature  影響因子:41.6
    外國研究人員首先借助蛋白互作實(shí)驗證實(shí)TRBP蛋白能夠在不依賴(lài)于DICER酶的作用下與FTSJ3結合,形成復合物,因此推測,FTSJ3是一種2'-O-甲基化轉移酶。接著(zhù),體外和體內實(shí)驗表明FTSJ3就是一種通過(guò)TRBP被招募到HIV RNA上的2'-O-甲基化轉移酶。通過(guò)優(yōu)化的2'-O-RNA甲基化測序手段,證實(shí)在HIV病 毒遺傳信息的特定位置上存在依賴(lài)于FTSJ3的2'-O-甲基化修飾。綜上,該研究證實(shí)TRBP-FTSJ3復合物通過(guò)招募到HIV病 毒RNA發(fā)生2'-O-甲基化從而解釋了HIV病 毒逃避宿主細胞先天免疫識別的機制。
           TRBP蛋白在不依賴(lài)于DICER酶情況下與FTSJ3結合;HIV病毒RNA上存在多處2’-O-RNA甲基化位點(diǎn)
    圖2. TRBP蛋白在不依賴(lài)于DICER酶情況下與FTSJ3結合;HIV病 毒RNA上存在多處2'-O-RNA甲基化位點(diǎn)

    樣本要求
    樣品類(lèi)型 
    細胞、組織或RNA,其他樣本類(lèi)型請電詢(xún)。 
    樣品量
    a) 細胞:1×10
    b) 組織:500 mg - 5g
    c) RNA:100 μg - 300 μg (OD260/280:1.6-2.3; RNA無(wú)明顯降解) 

    樣品運輸及保存
    樣品運輸:樣品置于1.5mL離心管中,封口膜封好,干冰運輸。 
    樣品保存:細胞樣品或新鮮組織塊可用TRIZOL或RNA保護劑處理,液氮凍存后-80℃保存;RNA樣品可溶于乙醇或RNA-free的超純水中,-80℃保存,避免反復凍融。


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